PCR 实验室项目建设方案

PCR 实验室项目介绍：PCR技术在整个生命科学领域具有很高的先进性，但是，如果缺乏对PCR技术完整深入的了解，以及相应的质量保证措施，就会导致检验结果有很大的主观 性和随意性，常常出现假阳性和假阴性。

    根据基因扩增检验技术的特点和临床疾病诊断的需要，国家卫生部于2002年1月下发了《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》，对基因扩增检验实验室的设置、技术验收、人员培训、监督管理等作了全面的规定，要求从事临床基因扩增检验的技术人员必须经过上岗培训，持证上岗。临床基因扩增检验实验室是 整个PCR实验的操作场所，它的设置是否合理直接影响到PCR实验结果的准确性，所以它必须按照国家卫生部颁布的《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》进行设置。

    标准PCR实验室是一种规格、大小、排列、布局、设置、工作规范、操作程序和管理制度等都一定，且经过多位专家和多家医院反复论证，并符合国家卫生部的《临床基因扩增检测实验室基本设置标准》要求的临床基因扩增检验实验室。它采用全自动荧光定量PCR检测系统，只要设置三个工作区域，即：试剂准备区，标本制备区和PCR扩增区。

     它将三个工作区域按最理想的状态排列在一起，在三个工作区域前各设置一个缓冲区，如图１所示：

在三个缓冲区内设有挂衣架和整理盒，可供工作人员换工作服和工作鞋使 用。每间实验室和缓冲区顶部都安装有照明灯、紫外线灯和排风扇。

 （一）标准PCR实验室设计原则

1、标准PCR实验室的工作区

（1）试剂准备区 设置有实验桌、柜子、冰箱、可移动紫外灯、与标本制备区连通的传递窗和 椅子，在实验桌上可放置实验仪器设备（包括离心机、震荡器、移液器、离心管、 废液缸和垃圾筒等）。

（2）标本制备区 设置有实验桌、生物安全柜、冰箱、可移动紫外灯、水槽和椅子，在实验桌 上和生物安全柜内还放置有实验仪器设备（包括离心机、恒温金属浴、移液器、 离心管、废液缸和垃圾筒等）。

（3）PCR扩增区 设置有实验桌、柜子、与标本制备区连通的传递和椅子，在实验桌上放置有 实验仪器设备（包括定量PCR扩增仪、电脑、打印机、废液缸和垃圾筒等）。

    标准PCR实验室如图２所示，前面设置有专用走廊，走廊的一侧是各实验区的缓冲区。三间实验区的布置依次为试剂准备区，标本制备区以及PCR扩增区。

2.标准PCR实验室各工作区之间注意事项 各工作区必须有明确的标记，避免不同工作区域内的设备、物品滥用。 进入各工作区域必须严格按照单一方向进行，即：试剂准备区→标本制备区 →PCR扩增区。 不同的工作区域使用不同的工作服，工作人员离开各工作区域时，不得将工作服带出。

（二）气流方向设置

 为了防止环境对扩增产物的影响，按临床基因扩增实验室调协要求，各实验 区的气流设置方向为：空气由试剂准备区流向缓冲区Ⅰ，标本制备区流向缓冲区Ⅱ，缓冲区Ⅲ流向PCR扩增区（如图2所示）。

因此，工作时，应使缓冲区Ⅰ、 缓冲区Ⅱ和PCR扩增区为负压，其他各室为“0”压或“+”压。可打开缓冲区Ⅰ，缓 冲区Ⅱ和PCR扩增区的排风扇往外排气，并且在实验区的外墙上各扇门上都安装。